پاورپوینت سمینار با عنوان کروماتوگرافی تمایلی( Affinity Chromatography):
شرح مختصر:
این فایل حاوی مطالعه ای با عنوان کروماتوگرافی تمایلی( Affinity Chromatography) میباشد که با فرمت پاورپوینت -قابل ویرایش در۱۸ اسلاید بسیار زیبا و با کیفیت در اختیار شما عزیزان قرار گرفته است ،در صورت تمایل می توانید این محصول را از فروشگاه خریداری و دانلود فرمایید.
بخشی از متن فایل :
کروماتوگرافی تمایلی :
تعریف : کروماتوگرافی تمایلی یک روش برای تخلیص انتخابی یک مولکول یا گروهی از مولکولها از یک مخلوط پیچیده براساس برهمکنش های اختصاصی بیولوژیکی بین دو مولکول است .
برهمکنش از نوع دوفازی است :
فاز ثابت لیگاند
فاز متحرک مولکول هدف که قصد داریم از مخلوط واکنش جدا کنیم .
اجزای واکنش عبارتنداز :
۱ - ماتریکس تمایلی ۱ - پروتئینهای متصل شونده به ایمونوگلوبولین
۲ – لیگاند تثبیت شده در ماتریکس
۲ – لکتین Lectin
۳- ماتریس تمایلی Affinity matrices carrying specific ligands
برچسب چیست ؟
برچسبها توالیهای پلی پپتیدی یا پروتئینی هستند که از طریق مهندسی ژنتیک در ژن پروتئین هدف تعریف می شوند و از طریق وکتورهای بیانی و القا در سلول میزبان مناسب به دست می آیند، تا نتایج زیر را به دنبال داشته باشند:
- افزایش حلالیت پروتئین هدف
- افزایش پایداری و القای بیان بیشتر در پروتئین
- امکان اتصال تمایلی پروتئین موردنظر به عامل تثبیت شده در ماتریکس ستون کروماتوگرافی
- برچسبهای برشی برای حذف برچسبهای اشاره شده در بالا تا پروتئین هدف با توالی کامل به دست آید.
برچسبهای تمایلی پروتئینی
- His _ tags :
تعریف : شامل ۶ یا بیشتر باقیمانده ی هیستیدین پشت سرهم است و به یونهای فلزی Ni ²⁺ و Co ²⁺ تثبیت شده روی دانه های کروی یا رزین ماتریکس وصل شده و تخلیص می شوند.
روند کار :این برچسب به انتهای N از پروتئین هدف وارد شده و پروتئین نوترکیب در ستون کروماتوگرافی از طریق حلقه ایمیدازول هیستیدین به یونهای فلزی وصل می شود و در آخر از طریق آبشویی برای تخلیص با استفاده از بافر ایمیدازول به دست می آید.
- GST tags :
تعریف : یک پروتئین یوکاریوتی باkDa ۲۶ است و از Schistosoma japonicum به دست می آید و به انتهای N پروتئین هدف وصل می شود ولی وقتی به انتهای C وصل می شود خیلی کم حلالیت پروتئین را بالا می برد و عملکرد تمایلیش همچنان باقی می ماند.
روند کار : پروتئین از طریق برچسب به گلوتاتیون تثبیت شده روی رزین وصل شده و بعداز شستن عمل آبشویی برای تخلیص (elution ) انجام می شود با استفاده از محلول حاوی گلوتاتیون احیا شده ی آزاد....................